Оснащение:
- Чашки Петри со средами Эндо и Плоскирева для прямого посева. Пробирки с селенитовым бульоном как средой обогащения.
- Штатив для пробирок.
- Перчатки.
- Бланк-направление, стеклограф.
Подготовка к процедуре.
- Подготовить необходимое оснащение.
- Выписать направление в баклабораторию.
- Поставить стеклографом номер на пробирке, соответствующий номеру в направлении.
- Вымыть и осушить руки надеть перчатки.
Выполнение процедуры.
- Уложить ребенка на левый бок с согнутыми в коленях и приведенными к животу ногами.
- Раздвинуть ягодицы ребенка 1 и 2 пальцами левой руки и зафиксировать ребенка в данном положении.
- Правой рукой взять металлическую петлю и осторожно вращательными движениями ввести ее в прямую кишку и собрать содержимое со стенок.
- Примечание: глубина введения петли у детей раннего возраста 3 – 4 см., у старших детей – 6 – 8 см.; петлю продвигают вначале по направлению к пупку, затем параллельно позвоночнику.
- Извлечь петлю из прямой кишки и произвести прямой посев на питательные среды. Либо поместить петлю в пробирку с селенитовым бульоном.
- Примечание: не брать кал с явными примесями крови, т.к. кровь имеет бактерицидные свойства.
Завершение процедуры.
- Снять перчатки, поместить в дезраствор.
- Вымыть и осушить руки.
- Отправить материал в баклабораторию в сопровождении направления (допускается хранение пробирки в холодильнике при температуре +3 - +40С).
После я приступила к взятию материала на носительство стафилакокка
Взятие материала из носа:
- Усаживаем пациента, объясняем ход процедуры.
- Берем стерильный ватный тампон, и не касаясь наружной поверхности носа вводим его в правый носовой ход.
- Снимаем слизь со стенок носовой перегородки.
- Вынимаем тампон из носа.
- Этот же тампон, не касаясь наружной поверхности носа, вводим в левый носовой ход.
- Снимаем слизь со стенок носовой перегородки
- Вынимаем тампон из носового хода.
- Делаем первичный посев материала на среду ЖСА тампоном, на половину чашки. (на вторую половину сеют материал из зева)
- Засеянные чашки помещают в термостат при 37*С
Взятие материала из зева:
- Усаживаем пациента, объясняем ход процедуры.
- Просим пациента открыть рот.
- В левую руку берем шпатель и вводим его в ротовую полость.
- Придавливаем язык книзу и немного кпереди.
- В правую руку берем стерильный тампон и вводим в полость рта не касаясь губ, языка, зубов и боковых стенок полости рта.
- Снимаем налет и слизь с миндалин , дужек мягкого неба и задней стенки глотки.
- Вынимаем тампон изо рта обследуемого, затем вынимаем шпатель.
- Делаем первичный посев материала на среду ЖСА тампоном на вторую половину чашки.
- Засеянные чашки помещают в термостат при 37*С .
Взятие материала на носительство дифтерии
Цель исследования: выделение возбудителя дифтерии.
Взятие материала из носа на дифтерию и первичный посев на среду:
Оборудование: стерильный ватный тампон, чашка Петри со средой КБА, стеклограф, петля, штатив, пробирки, шпатели в крафт - пакете.
Ход работы:
- Усаживаем пациента, объясняем ход процедуры.
- Берем стерильный ватный тампон, и не касаясь наружной поверхности носа вводим его в правый носовой ход.
- Снимаем слизь со стенок носовой перегородки.
- Вынимаем тампон из носа.
- Этот же тампон, не касаясь наружной поверхности носа, вводим в левый носовой ход.
- Снимаем слизь со стенок носовой перегородки
- Вынимаем тампон из носового хода.
- Делаем первичный посев материала на среду Клауберга тампоном, на половину чашки. (на вторую половину сеют материал из носа)
- Сначала делаем посев на участке площадь. 2*1кв.см. всей поверхностью тампона. Остальную площадь засевают этим же тампоном, круговыми движениями втирая материал в поверхность среды.
- Засеянные чашки помещают в термостат при 37*С
16. Взятие материала из зева на дифтерию и первичный посев на среду:
Оборудование: стерильный ватный тампон, чашка Петри со средой КБА, стеклограф, петля, штатив, пробирки, шпатели в крафт - пакете.
Ход работы:
- Усаживаем пациента, объясняем ход процедуры.
- Просим пациента открыть рот.
- В левую руку берем шпатель и вводим его в ротовую полость.
- Придавливаем язык книзу и немного кпереди.
- В правую руку берем стерильный тампон и вводим в полость рта не касаясь губ, языка, зубов и боковых стенок полости рта.
- Снимаем налет и слизь с миндалин , дужек мягкого неба и задней стенки глотки на границе пораженного и здорового участков.
- Вынимаем тампон изо рта обследуемого, затем вынимаем шпатель.
- Делаем первичный посев материала на среду Клауберга тампоном, на половину чашки. (на вторую половину сеют материал из зева)
- Сначала делаем посев на участке площадь. 2*1кв.см. всей поверхностью тампона. Остальную площадь засевают этим же тампоном, круговыми движениями втирая материал в поверхность среды.
- Засеянные чашки помещают в термостат при 37*С .
Цифровой отчет:
Выписка направленный-42
Заполнение журнала-3
Выписка результатов-42
Взятие материала на стафилакокк-10
Взятие материала на носительство дифтерии -12
Взятие материала на кишечную группу-20
Шестой день практики.Шестой день я продолжила в регистратуре. В этот день я забирала материал на холеру(форма №30)
Взятие материала на холеру
Методы первого, второго, третьего, четвертого дня исследования при выделении и идентификации холерного вибриона. Тесты, применяемые для идентификации культуры холерного вибриона.
Алгоритм действия:
1. Материал засейте в 1% пептонную воду объемом 50-100мл.
2. Параллельно засейте материал на щелочной агар
3. Из материала приготовьте мазки, зафиксируйте в смеси Никифорова
4. Мазки из материала окрасьте фуксином и по Граму
5. Проверьте подвижность в раздавленной и висячей капле
6. Через 6-8 часов исследуйте пептонную воду на наличие пленки на поверхности среды
7. Пересейте на вторую пептонную воду
8. Приготовьте мазок из посева, окрасьте по Граму и фуксином
9. Поставьте с культурой ориентировочную реакцию агглютинации на стекле с О сывороткой
10. Поставьте с культурой ориентировочную реакцию агглютинации на стекле с О сывороткой
11. Колонии с щелочного агара изучите в РА
12. При положительной РА ставьте реакцию с типовыми сыворотками Огава и Инаба
13. При положительно РА изучите типичные морфологию и культуральные свойства
14. Типичную культуру высейте на полиуглеводную среду и бульон
15. После инкубации в течении 3-4 часов с бульонной культурой ставьте развернутую РА
16. Полиуглеводная среда изменяет цвет столбика (расщепление сахарозы), скошенная часть не меняется
17. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – морфология
18. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – подвижность в висячей или раздавленной капле
19. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – культуральные свойства
20. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – сахаралитические свойства
21. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – протеолитические свойства
22. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – гемолитические свойства
23. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – уреазная активность
24. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – восстановительные свойства (реакция холера-рот) восстанавливают нитраты в нитриты
25. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – диастатическая активность (расщепляет крахмал)
26. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – реакция Фогес-Проскауэра (красное окрашивание культуры при добавлении специального химического ингредиента)
27. Сделайте тест, идентифицирующий культуру холерного вибриона – проба на оксидазу (культура при добавлении специального химического ингредиента окрашивается в ярко-синий цвет)
Цифровой отчет:
Прием мазков из зева на холеру-6
Прием мазков из носа-6
Выписка направленный-6
Заполнение журнала-1
Выписка результатов-6
Седьмой день практики .День началсяв отделе по кишечным инфекциям.Цель: Прием и регистрация анализов.
Провести обеззараживание инфицированного материала, рабочего места, случайно загрязненных участков тела, одежды, предметов рабочего стола.Подготовка биологического субстрата( кал, моча, отделяемое из ран, ушей, влагалища, уретры, рвотные массы, промывные воды, ) к бактериологическому исследованию и первичный посев на твердые питательные среды и среды накопления.
Работа с термостатом и центрифугой. Техника безопасности.Выделение чистой культуры микроорганизмов и изучение ее основных свойств (морфологических, культуральных, биохимических, антигенных свойств).Приготовить микропрепараты из микробных культур и патологического материала, окраска их простыми и сложными методами окраски (по Граму, окраска капсул по Бурри по Цилю Нильсену и т.д.).Микроскопирование с иммерсионной системой и в «темном поле».
Приготовить нативные препараты висячей и «раздавленной» капли. Микрокопирование.Постановка и учет иммунологических реакций: агглютинации на стекле и объемным методом, РПГА. Регистрация и выдача результатов. Ведение дневников
Микробиологическое исследование.
Цель исследования:выделение возбудителей заболевания и определение серовара сальмонелл.
Материалом для исследования могут быть:испражнения, кровь, моча, рвотные массы, промывные воды, дуоденальное содержимое. В данном случае материалом для исследования служит испражнения взятые с помощью тампона из прямой кишки(ректальный метод).Доставка материала в лабораторию должна осуществляться в течение 2 ч.После сбора материала, тампон помещают в селенитовый бульон(среда обогащения- для накопления сальмонелл) и ставят в термостат при температуре 37 градусов на 24 ч.Посев материала на дифференциальные среды Плоскирева, Эндо и ВСА (висмут-сульфит агар)
Посев на ВСА:
1.Подписала чашку Петри со средой- поделила на две части и подписала каждую сторону.
2.Взяла тампон с материалом- сначала сделала площадку, а затем произвела посев штрихами до половины чашки.
3.Следующий посев произвожу на другой половине чашки Петри.(18 чашек)
4.Чашки ставлю в термостат при температуре 37 градусов на 24 ч.
Колонии сальмонелл на среде ВСА- мелкие,черные,блестящие,когда снимают петлей оставляют черное дно.
Колонии сальмонелл на среде Плоскирев- мелкие нежные, полупрозрачные,с ровными краями.
Колонии сальмонелл на среде Эндо- мелкие нежные,розовые, полупрозрачные.
Обработала стол дез.средством.
5.Просмотр чашек,отсев подозрительных колоний на среду Клиглера (трехсахарная среда).Изменение цвета среды в скошенной части при расщеплении сахарозы и лактозы, а изменение цвета в столбике- при расщеплении глюкозы. Сами бактерии при ферментации углеводов образуют газ (водород и углекислый газ),происходит скопление газа на дне пробирки. Эта среда позволяет определить образование сероводорода, при этом агар чернеет.
6.Постановка биохимического ряда- ПБДЭ(см.табл.)
7.Фаготипирование(делается параллельно с биохимией)