Благодаря установлению стероидного строения генинов сердечных гликозидов выявлена близость их структур к весьма важным природным соединениям — желчным кислотам, холестерину, половым гормонам, гормонам коры надпочечников и витамину О.
В растениях из сквалена в результате свертывания его молекулы образуются фитостерины; наиболее распространенным является р-ситостерин. Предполагается, что оба типа сердечных гликозидов образуются из р-ситос-терина за счет изменения структуры боковой цепи у С-17.
На образование и накопление сердечных гликозидов в растении влияют фаза вегетации и погодные условия, поэтому сбор растений, содержащих сердечные гликозиды, следует проводить только в сухую солнечную погоду. Ввиду нестойкости гликозидов заготовленное сырье немедленно подвергают сушке. Сушку проводят при температуре 60—70 °С, чтобы инактивировать ферменты. Высушенное сырье нужно хранить в сухом помещении, оберегая от сырости, так как во влажной среде ферменты вновь активируются и вызывают гидролиз гликозидов. В процессе выделения сердечных гликозидов необходимо учитывать, что в большинстве случаев в растении содержится комплекс гликозидов, нередко до 10—30 близких соединений. Наряду с этим в растении присутствуют и другие группы веществ, имеющие стероидную структуру, в частности сапонины. Последние изменяют растворимость сердечных гликозидов, образуют коллоидные растворы, что затрудняет их выделение.
Сердечные гликозиды очень чувствительны к изменению рН среды. В щелочной среде они превращаются в физиологически неактивные соединения. В кислой среде гликозиды легко гидролизуются. Многие агликоны подвергаются окислению кислородом воздуха. Повышенная температура среды вызывает разрушение сердечных гликозидов. Перечисленные свойства нельзя не учитывать при выборе метода получения гликозидов. Принципиально различают два способа: при первом, когда преследуется цель получить гликозиды в неизмененном нативном состоянии, предотвращают действие ферментов; при втором, наоборот, создают условия для ферментативного расщепления гликозидов, богатых остатками Сахаров, для получения легко кристаллизующихся моногликозидов.
Первой стадией получения сердечных гликозидов является их экстракция из растительного сырья. Проводят ее в аппарате Сокслета смесью хлороформа с этанолом (9:1). Далее отгоняют под вакуумом хлороформ досуха, сухой остаток растворяют в этаноле; полученный раствор разводят водой и добавляют водный раствор основного ацетата свинца для осаждения сопутствующих веществ. После отстаивания и отделения осадка из фильтрата с помощью раствора сульфата натрия удаляют избыток свинца. Получают прозрачный раствор, содержащий сумму гликозидов.
Наиболее сложной и трудной задачей является последующее разделение комплекса сердечных гликозидов на индивидуальные соединения. Этого удается достичь с помощью различных методов хроматографии. После расщепления молекулы гликозида выделяют сахарный компонент и агликон. Для гидролиза используют ферменты, что обеспечивает более мягкое, ступенчатое отщепление
Сахаров, или кислоту, которая отщепляет всю углеводную часть молекулы. В гидролизе сердечных гликозидов часто используют ферментный препарат, полученный из панкреатического сока виноградной улитки.
В дальнейшем проводят изучение сахарного компонента и агликона.
Для доказательства наличия карденолидов в лекарственном сырье предложены качественные реакции на пятичленное ненасыщенное лактонное кольцо: 1) реакцию Балье проводят с щелочным раствором пикриновой кислоты, при наличии карденолидов испытуемая вытяжка приобретает оранжево-красное окрашивание. Положительную реакцию дают и другие соединения, содержащие в своей молекуле ненасыщенное пятичленное лак-тонное кольцо; 2) реакцию Легаля проводят со щелочным раствором нитро-пруссида натрия. При этом испытуемая вытяжка приобретает красное окрашивание. Эта реакция также неспецифична. Более достоверные результаты дает сочетание нескольких реакций: на стероидный цикл, дезоксисахара, пятичленное лактонное кольцо. Помимо двух упомянутых реакций, известны также реакция Раймонда — с мета-динитробензолом (красно-фиолетовое окрашивание), реакция Кедде — с 3,5-динитробензолом (фиолетово-синее окрашивание) и др. Специфической реакции на кумариновое кольцо до сих пор не найдено.
На стероидную часть структуры кардиотонических гликозидов проводят реакции с кислотными реагентами. При этом образуются сопряженные ненасыщенные системы, имеющие различные окраски: реакция Либермана—Бур-хардта, реакция Розенгейма. Среди реакций на углеводную часть весьма специфической является реакция Келлер—Киллиани на дезоксисахара.
Для идентификации кардиотонических гликозидов на хроматограммах используют реактивы на бутенолидное кольцо и стероидную структуру.
Для идентификаций буфадиенолидов обязательно снятие их УФ-спект-ров, где они имеют характерную полосу поглощения при 300 нм. 3) Реакция на углеводную часть (дезоксисахара)Реакция Келлер-Килиани. Извлечение из сырья +1 раствор сульфата окисного железа Fe2(SO4)3 в лед уксусной кислоте, раствор Ft2(SO4)3 в конц. кислоте серной растворы накаливаю в пробирке, при этом первый слой окрашив. в васильково-синий цвет. Реакция на стероидное ядро (ЦППГФ): реакция Либермана- Бурхарда ищвлечение +к-та уксусная+ уксусный ангедрид+концентрир к-та серная. Появляется розовая окраска, переход в зеленую, затем в синюю
Физико-химические св-ва:1) кристаллические в-ва бесцветные кремовые, без запаха, горького вкуса; 2) Хр в воде и водном спирте, агликоны хр в органических растворителях; 3)Имеет специфич. флюоресценцию в Уф свете, желтовото-зеленые голубовато-зеленая окраска; 4) Очень лабильны, легко гидролизуются килотами и щелочами. 5) оптически активны. Сушка: при 50-60 в течение 2 часов, уменьшаем. темпер. до40. Хранение: по списку Б, А в сухом прохладном , темном месте опред. биологической активности в раз в год.
27.Общая характеристика горьких гликозидов, виды ЛРС, их содержание и применение в медицине.
Горькие вещества, или горечи (Аmаrа), издавна применяются в качестве лекарственных средств, возбуждающих аппетит и тем самым улучшающих пищеварение. В этом отношении они очень сходны с пряными веществами, содержащими эфирные масла и оказывающими влияние на секрецию пищеварительных желез. Разница заключается в том, что горечи повышают секрецию медленно, но более устойчиво.
Горькие вещества в растениях могут встречаться совместно с эфирными маслами. Такие природные сочетания в отличие от чистых горечей (Атага рига) называются "ароматическими горечами" (Атага аготаИса) и рассматриваются вместе с эфирно-масличными растениями. В некоторых растениях горькие вещества сочетаются со слизистыми веществами . Эта группа веществ была охарактеризована при описании растений, богатых полисахаридами.Горечи не оказывают ярко выраженного действия. Это отличает их от многих других природных веществ, которые, хотя и имеют горький вкус, не могут относиться к этой группе веществ ввиду специфичности их действия и нередко высокой токсичности (алкалоиды).
Горькие вещества по природе являются гликозидами. Однако степень изученности их агликонов наименьшая. Многие из горьких гликозидов долгое время носили эмпирические названия (тараксацин, мениантин и т.п.), которые больше говорили об их происхождении, чем о химической природе. Только в последнее время прояснилась структура агликонов этих гликозидов. Большинство их относится к иридоидам, которые являются производными монотерпенов. Как и у других монотерпенов, предшественником иридоидов является геранилпирофосфат, который подвергается циклизации и, пройдя стадию альдегида (иридодиаль), превращается в 10-С-иридоид.
В разных растениях могут происходить дальнейшие биогенетические изменения с образованием иридоида с меньшим количеством атомов углерода (9, 8, 7). Может разрываться пятичленный цикл с образованием секо-иридоида типа секологанина или более сложных циклических соединений (секоиридоид типа генциопикрозида).
Качество лекарственного сырья, содержащего горечи, может проверяться органолептически — по показателю горечи, т.е. степени разведения первичного водного извлечения из сырья, когда в конечном разведении еще ощущается горький вкус.
Все горечи рекомендуют принимать за 15—20 мин до еды. Применяют при гипацидных и хронических атрофических гастритах, в сочетании с желчегонными и другими лекарственными средствами. Горечи не назначают при повышенной желудочной секреции, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.