Биуретовый метод

Биуретовый метод: белки в щелочной среде в присутствии солей меди дают фиолетовое окрашивание, интенсивность которого определяется на ФЭКе, и по калибровочной кривой определяется содержание белка. Если количество белка в сыворотке меньше 65 г/л – гипопротеинемия, если больше 85, то – гиперпротеинемия. Распространённым методом разделения белков сыворотки крови является электрофорез на бумаге, по средством которого можно разделить белки на 5 фракций: альбумины, альфа1-, альфа2-, бета и гамма глобулины. Сущность метода: электрофорезом называется процесс передвижения заряженных частиц под действием электрического поля. Разделение белков основано на различной скорости перемещения белков в электрическом поле в зависимости от знака и величины электрического заряда и молекулярной массы белка. В плазме крови содержится 7% всех белков организма, концентрация 60-80 г/л. Функции: поддержание осмотического давления (белки связывают воду и удерживают её в кровеносном русле), образуют белковую буферную систему крови и поддерживают pH в пределах 7,37-7,43; выполнят транспортную функцию, определяют вязкость крови, являются резервом аминокислот в организме, осуществляют защитную функцию. При ряде заболеваний происходит изменение соотношения белковых фракций при электрофорезе по сравнению с нормой. Такие изменения называются диспротеинемия. Содержание некоторых белков резко увеличивается при патологических состояниях, такие белки называются – белки острой фазы. К ним относятся: С-реактивный белок, альфа1 антитрипсин, гаптоглобин, кислый гликопротеин, фибриноген. №9 Иммуноглобулины – специфические белки, вырабатываемые б-лимфоцитами в ответ на попадание в орг чужеродных стр-р, наз антигенами. Молекула сост из 4х полипептидных цепей, 2х идентичных лёгких-L, содерж ок 220 аминок-тных остатков и 2х тяжёлых-H, сост из 440 аминок-т каждая. Все 4 цепи соединены друг с другом множеством нековалентных и 4-мя дисульфидными связями. Связывание антигена с антителом участвует не вся аминок-ная последовательность обеих цепей, а всего лишь 20-30 аминок-т, расположенных в гипервариабельных облостях каждой цепи. Именно эти области определяют уникальные способности каждого клона антител взаимодействовать с соответствующим комплиментарным антигеном. Обнаружение и связ чужеродных антигенов происходит с помощью специфических антигенсвязывающих участков. Специфичность пути разрушения комплекса антиге – антитело зависи от класса антител. Существует 5 классов иммуноглобулинов: A, D, G, E, M. М – первый класс антител, развив в б-лимфацитах. Взаимодейств антигена с М изменяет его конформацию, наруш целостность мембраны и убивает клетку. G сост 75%, способен проникать через плацентарный барьер и обеспечивать внутриутробную защиту плода от инф. А – присутствует в секретах желёз орг: слюна, пищ сок. Образующийся при взаим с антигеном комплекс препятствует прикреплению антигенов к пов эпителиальных клеток и проникновению их в орг. Е – содерж в крови крайне мало. Способствует секреции БАВ (серотонин, гистамин. D – в очень малых колич.